Detección de dos canales frente a un canal

Microarrays bicolor o microarrays bicanal normalmente se hibrida con cDNA preparado a partir de dos muestras que se van a comparar (p. Ej. Tejido enfermo frente a tejido sano) y que se marcan con dos fluoróforos diferentes. Los tintes fluorescentes que se utilizan típicamente para el etiquetado de ADNc incluyen Cy3, que tiene una longitud de onda de emisión de fluorescencia de 570 nm (correspondiente a la parte verde del espectro de luz), y Cy5 con una longitud de onda de emisión de fluorescencia de 670 nm (que corresponde a la parte roja de la luz). espectro). Las dos muestras de ADNc etiquetadas con Cy se mezclan e hibridan con un solo microarray que luego se escanea en un microarray escáner para visualizar la fluorescencia de los dos fluoróforos después de la excitación con un rayo láser de una longitud de onda definida. A continuación, pueden usarse intensidades relativas de cada fluoróforo en un examen basado en la proporción para revelar genes regulados por incremento y regulados por disminución.

Imagen 146A | Dos chips Affymetrix. Se muestra una coincidencia en la parte inferior izquierda para comparar el tamaño. | No se proporciona ningún autor legible por máquina. Schutz asumió (basado en reclamos de derechos de autor). / CC BY-SA (http://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Affymetrix-microarray.jpg) de Wikimedia Commons

Autor : Milos Pawlowski

Referencias:

Técnicas de biología molecular I

Herramientas de biología molecular II