Reducir CRISPR-Cas9 cortes fuera del objetivo

AcrIIA4 es una de las proteínas responsables de la inhibición del sistema CRISPR-Cas9, el mecanismo utilizado en la edición de células de mamíferos. La adición de AcrIIA4 en células humanas evita la interacción de Cas9 con el sistema CRISPR, reduciendo su habilidad para cortar DNA. Sin embargo, diversos estudios han llegado a la conclusión de que agregarlo en pequeñas proporciones después de que se ha realizado la edición del genoma, reduce la cantidad de cortes fuera del objetivo en los sitios concretos en los que interactúa Cas9, algo que hace que todo el sistema sea mucho más preciso.

Evitando consecuencias ecológicas

Uno de los principales objetivos del uso de la tecnología CRISPR-Cas9 es la erradicación de enfermedades, algunas de las cuales se encuentran en vectores de enfermedades, por ejemplo, los mosquitos. Anti-CRISPR Las proteínas Anti-CRISPR pueden impedir el impulso genético, lo que podría crear consecuencias inciertas y catastróficas en los ecosistemas.

Imagen 198A | Diagrama que muestra el sistema CRISPR-Cas tipo IF, además de los mecanismos de inhibición de tres anti-CRISPR tipo IF. El tipo IF CRISPR complex está compuesto por 60 crRNA nucleótidos y nueve proteínas Cas (el tipo de proteína se especifica con los números 5,8,7,6). AcrF1 va a Cas7f, impidiendo el acceso del objetivo DNA a la guía crRNA. AcrF2 interactúa con Cas8f y Cas7f, lo que dificulta el acceso del objetivo DNA al bolsillo de unión. Finalmente, AcrF3 forma un homodímero, interactuando con Cas3 evitando su contacto con la Cascade complex. Basado en una representación de una revisión que se encuentra en las referencias a continuación. | BQUB19-SEsteban / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Type_I-F_CRISPR-Cas_system_and_inhibition_mechanisms_of_three_type_I-F_anti-CRISPRs..png) from Wikimedia Commons

Imagen 198A | Diagrama que muestra el sistema CRISPR-Cas tipo IF, además de los mecanismos de inhibición de tres anti-CRISPR tipo IF. El tipo IF CRISPR complex está compuesto por 60 crRNA nucleótidos y nueve proteínas Cas (el tipo de proteína se especifica con los números 5,8,7,6). AcrF1 va a Cas7f, impidiendo el acceso del objetivo DNA a la guía crRNA. AcrF2 interactúa con Cas8f y Cas7f, lo que dificulta el acceso del objetivo DNA al bolsillo de unión. Finalmente, AcrF3 forma un homodímero, interactuando con Cas3 evitando su contacto con la Cascade complex. Basado en una representación de una revisión que se encuentra en las referencias a continuación. | BQUB19-SEsteban / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Type_I-F_CRISPR-Cas_system_and_inhibition_mechanisms_of_three_type_I-F_anti-CRISPRs..png) from Wikimedia Commons

Autor : John Kaisermann

Referencias:

Técnicas de biología molecular II

Herramientas de biología molecular IV

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