La RPA es una de las varias técnicas de amplificación de ácidos nucleicos isotérmicos que se desarrollarán como técnica de diagnóstico molecular, frecuentemente con el propósito de simplificar la instrumentación de laboratorio requerida en relación con PCR. Una lista parcial de otras técnicas de amplificación isotérmica incluye LAMP, NASBA, amplificación dependiente de helicasa (HDA) y reacción de amplificación de enzima de corte (NEAR). Las técnicas difieren en los detalles de la disposición del cebador y el mecanismo de reacción, y en algunos casos (como RPA) utilizan cócteles de dos o más enzimas. Al igual que la RPA, muchas de estas técnicas ofrecen tiempos de amplificación rápidos con el potencial de simplificar la instrumentación y resistencia reportada a sustancias en muestras no purificadas que se sabe que inhiben PCR. Respetando el tiempo de amplificación, los termocicladores modernos con rampas de temperatura rápidas pueden reducir los tiempos de amplificación de PCR a menos de 30 minutos, en particular para amplicones cortos que utilizan ciclos de temperatura dual en lugar de los protocolos convencionales de tres temperaturas. Además, las demandas de preparación de muestras (incluida la lisis y extracción de DNA o RNA, si es necesario) deben considerarse como parte del tiempo y la complejidad típicos inherentes a la técnica. Estos requisitos varían según la técnica, además del objetivo específico y el tipo de muestra.
Imagen 249A | Una representación esquemática del mecanismo molecular implicado en el cribado de células recombinantes | Dylan2106 / Public domain | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Blue_white_assay_Ecoli.jpg) from Wikimedia Commons
Autor : Milos Pawlowski
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